生物樣品的**凍存取決于冷凍的速率,**的溫度控制和合理的溫度梯度(+50℃
-180℃)。當(dāng)溫度降至-180℃時(shí),大部分生物樣品可轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期保存。
在細(xì)胞凍存的過程中,液態(tài)水轉(zhuǎn)化為冰,細(xì)胞代謝停止。同時(shí),水分也隨之散失,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鹽、代謝物濃度改變,進(jìn)而造成滲透壓失衡,直接影響凍存細(xì)胞的復(fù)蘇。同時(shí),冷凍速率太快或太慢,容易導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)水分喪失或形成大冰晶,都不利于細(xì)胞存活。通過使用程控降溫儀,選擇合適的凍存液,設(shè)定合適的升降溫速率,可有效地克服上述不利因素。實(shí)踐證明,(經(jīng)溫度補(bǔ)嘗后)每分鐘1-3℃的冷凍速率可大大提高凍存細(xì)胞的存活率。